一测多评法应用于化学药及中药的化学药成分质量控制研究进展

一测多评法（QAMS法）是通过采用一种对照品同时测定多种成分含量的定性定量分析方法,具有高选择性、经济、准确等特点,目前在化学药物、中药及其制剂的含量测定中已得到推广应用。简述了QAMS法建立流程,综述了近年来QAMS法在化学药物定量分析、中药的化学药物成分、中药违法添加化学药物及药物杂质的定性定量分析中的研究进展,并对其应用前景进行了展望。     

Pathologically triggered in situ aggregation of nanoparticles for inflammation-targeting amplification and therapeutic potentiation

Uncontrolled and persistent inflammation is closely related to numerous acute and chronic diseases. However, effective targeting delivery systems remain to be developed for precision therapy of inflammatory diseases. Herein we report a novel strategy for engineering inflammation-accumulation nanoparticles via phenolic functionalization. Different phenol-functionalized nanoparticles were first developed, which can undergo in situ aggregation upon triggering by the inflammatory/oxidative microenvironment. Phenolic compound-decorated poly (lactide-co-glycolide) nanoparticles, in particular tyramine (Tyr)-coated nanoparticles, showed significantly enhanced accumulation at inflammatory sites in mouse models of colitis, acute liver injury, and acute lung injury, mainly resulting from in situ cross-linking and tissue anchoring of nanoparticles triggered by local myeloperoxidase and reactive oxygen species. By combining a cyclodextrin-derived bioactive material with Tyr decoration, a multifunctional nanotherapy (TTN) was further developed, which displayed enhanced cellular uptake, anti-inflammatory activities, and inflammatory tissue accumulation, thereby affording amplified therapeutic effects in mice with colitis or acute liver injury. Moreover, TTN can serve as a bioactive and inflammation-targeting nanoplatform for site-specifically delivering a therapeutic peptide to the inflamed colon post oral administration, leading to considerably potentiated in vivo efficacies. Preliminary studies also revealed good safety of orally delivered TTN. Consequently, Tyr-based functionalization is promising for inflammation targeting amplification and therapeutic potentiation of nanotherapies.     

HPMEC-ELSD法检测注射用丹参多酚酸中大分子物质

目的 建立注射用丹参多酚酸（SAFI）中大分子物质（相对分子质量≥1.0×10⁴）的高效分子排阻色谱-蒸发光散射（HPMEC-ELSD）检测方法。方法 采用超滤离心方法（截留相对分子质量为3 000,转速为4 000 r·min^-1）对供试品溶液中的大分子物质进行分离富集。色谱条件为：检测器ELSD,Ultrahydrogel 500与Ultrahydrogel 250色谱柱串联,流动相0.02%甲酸水溶液,流动相体积流量0.6 mL·min^-1,柱温35℃,进样量10 μL,压缩空气体积流量2.5 L·min^-1,漂移管温度105℃,不分离模式,增益1。结果 该方法空白无干扰,专属性良好;精密度、重复性、加样回收率均良好;右旋糖酐在相对分子质量2 700～36 800线性良好,回归方程为Y＝－0.220 5 X＋10.247 0（R²＝0.994 5）;对照品溶液和供试品溶液50 h稳定性良好;不同流动相、流动相体积流量、柱温、压缩空气体积流量、漂移管温度等的耐用性良好。17批SAFI均未检出大分子物质。结论 建立的HPMEC-ELSD方法简便、快捷,可用于SAFI中大分子物质的检测。     

欧前胡素阻断Noxs-ROS通路抑制MKN-45及HT-29细胞增殖活性

目的 探讨欧前胡素对人胃癌细胞(MKN-45)和人结肠癌细胞(HT-29)中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(Noxs)-活性氧(ROS)氧化应激通路的作用及对肿瘤细胞增殖活性的影响。方法 MKN-45和HT-29细胞经过不同浓度(3、10、30、100 μmol/L)的欧前胡素及阳性对照二苯基氯化碘盐(DPI)处理后,使用CCK8法检测细胞增殖活性,使用DHE荧光探针检测细胞内ROS水平,使用Western blotting检测细胞内Nox1、Nox2、Nox3、Nox4、Nox5家族蛋白表达。结果 CCK8法结果显示,欧前胡素可浓度相关性地抑制MKN-45和HT-29细胞增殖活性;DHE荧光探针法结果显示,欧前胡素干预可使MKN-45和HT-29细胞荧光强度明显减弱,ROS水平降低;Western blotting结果显示,给予欧前胡素可使MKN-45细胞Nox1、Nox2、Nox3、Nox4、Nox5蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01、0.001),使HT-29细胞Nox1、Nox2蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。结论 欧前胡素可通过抑制MKN-45和HT-29细胞中Noxs-ROS通路,诱导细胞增殖活性下降,发挥抗肿瘤作用。     

一测多评法测定藏茴香中异绿原酸A、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C

目的 建立一测多评法（QAMS）测定藏茴香中6种咖啡酰奎宁酸类成分含量,并验证该方法在藏茴香质量评价中应用的可行性与适用性。方法 取藏茴香粉末（过三号筛）0.5 g,精密加入70%甲醇 20 mL ,超声处理（250 W、频率 53 kHz）30 min,制备供试品溶液;采用Phenomenex GeminiR C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为 330 nm,体积流量 1.0 mL·min^-1,柱温 30 ℃,进行专属性、供试品提取条件、检测波长选择、色谱条件、线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收率方法学考察,建立异绿原酸A、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸 B、异绿原酸 C成分含量检测的 HPLC法;以异绿原酸 A为内参成分,分别计算新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C 5种成分的相对校正因子,分别采用3种不同色谱仪和3种色谱柱进行相对校正因子、相对保留时间耐用性考察,对藏茴香样品同时采用外标法与 QAMS 测定 6 种成分的质量分数,比较 2 种测定方法结果的差异。结果 建立的6种成分的HPLC检测方法的专属性、供试品提取条件、检测波长选择、色谱条件、线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收率均符合要求;新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C的相对校正因子平均值分别是 1.362、1.257、1.335、1.470、1.134,3种不同色谱仪和 3种色谱柱对相对校正因子、相对保留时间均无明显影响;QAMS与外标法2种方法测定3批藏茴香样品中6种成分得到的结果之间无显著差异。结论 建立的QAMS简便、准确、可靠,可用于藏茴香中6种咖啡酰奎宁酸类成分——异绿原酸A、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C的定量分析。     

氧化应激反应在边缘供肝肝移植缺血-再灌注损伤中的作用研究进展

常见的边缘供肝主要包括脂肪变性供肝、高龄供肝、小体积供肝、心脏死亡器官捐献(DCD)供肝等。边缘供肝的应用可在一定程度上解决供肝数量严重短缺的问题,但边缘供肝面临着缺血-再灌注损伤(IRI)的难题,且IRI程度相比正常供肝更加严重,是导致移植失败的重要原因,其中氧化应激反应又是引起边缘供肝IRI的重要因素。因此如何减少氧化应激反应及解决边缘供肝IRI的难题成为临床研究的热点问题。活性氧簇(ROS)介导的氧化应激反应贯穿IRI整个过程,本文就氧化应激反应在边缘供肝肝移植IRI中的作用及以ROS为靶点的防治进行综述,以期为临床提供参考。     

湖北海棠总黄酮对卵巢早衰大鼠卵巢功能及骨代谢的影响

目的观察湖北海棠总黄酮对卵巢早衰大鼠卵巢功能及骨代谢的影响。方法将48只成年雌性大鼠随机分为空白组、模型组、戊酸雌二醇组及湖北海棠总黄酮高、中、低剂量组,每组8只。除空白组外,其余各组每天给予灌胃雷公藤多苷片(75 mg/kg),连续14 d,复制卵巢早衰模型。第15天起,戊酸雌二醇组给予灌胃戊酸雌二醇(1 mg/kg);湖北海棠总黄酮高、中、低剂量组分别给予灌胃湖北海棠总黄酮(160、80、40 mg/kg),每日1次,连续给药21 d。观察各组大鼠:动情周期;卵巢指数、子宫指数;血清中雌激素(E2)、孕激素(P)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平变化;卵巢、子宫形态学变化;血清碱性磷酸酶(ALP)、骨碱性磷酸酶(BALP)活性、1,25(OH)_2D_3含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量,检测卵巢组织中ERα的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,卵巢指数、子宫指数降低,血清中E2、P水平降低,FSH水平升高(P0. 05,P0. 01)。与模型组比较,戊酸雌二醇组和湖北海棠总黄酮治疗组血清生殖激素水平得到明显改善(P0. 05),卵巢内生长卵泡数量增多,子宫内膜增厚,血清中ALP活力、BALP含量降低,1,25(OH)_2D_3含量升高(P0. 05,P0. 01);血清中SOD活力增强,MDA含量降低;卵巢组织中颗粒细胞、基质细胞ERα的表达增强。结论湖北海棠总黄酮对卵巢早衰大鼠卵巢及骨质疏松具有一定的治疗保护作用,其作用机制可能与体内抗氧化能力、增强颗粒细胞内雌激素受体的表达密切相关。     

药用昆虫金环胡蜂及其混伪品DNA条形码鉴别研究

目的：以COI序列作为DNA条形码对药用昆虫金环胡蜂及其混伪品进行物种鉴别,探讨快速、准确鉴别金环胡蜂及其混伪品的方法。方法：以COI条形码序列为基础,对金环胡蜂及其近缘种混伪品黄纹大胡蜂进行总DNA提取、PCR扩增和双向测序,并比对GenBank中金环胡蜂及其混伪品的COI序列,继而用MEGA6.06软件对所有序列进行分析、计算种内及种间遗传距离,并用邻接（Neighbor-Joining,NJ）法构建出系统进化树。结果：金环胡蜂及黄纹大胡蜂COI序列扩增成功。金环胡蜂与其混伪品COI序列种间最小遗传距离为0.152±0.017,远大于金环胡蜂种内的最大遗传距离0.009±0.004。构建出的系统进化树图也明确显示,各物种都形成了独立的分支。结论：基于COI序列的DNA条形码技术可有效鉴别药用昆虫金环胡蜂及其混伪品,为其质量控制和市场监管提供了新的技术手段,保证金环胡蜂相关药材的安全性。     

一测多评法同时测定蒙药三子散中7种指标成分

目的:建立一测多评法同时测定三子散不同药材中的3类指标成分的含量,包括有机酸类(没食子酸、绿原酸),环烯醚萜苷类(羟异栀子苷、京尼平龙胆二糖苷、栀子苷),西红花苷类(西红花苷Ⅰ,西红花苷Ⅱ),并验证此方法用于三子散中7种指标成分测定的可行性和技术适用性。方法:采用Shimadzu C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 m L·min~(-1),检测波长(0~15 min)271 nm,(16~45 min)240 nm,(46~83 min)330 nm,(84~115 min)240 nm,(116~150 min)440 nm;以栀子苷为内参物建立与其他6种待测成分的相对校正因子,并用2台不同的色谱仪和3种不同的色谱柱对建立的相对较正因子的耐用性进行考察;用建立的校正因子进行计算,完成一测多评法含量测定。同时采用常规的外标法对这7种成分进行含量测定,用t检验评价2种方法测定结果的差异。结果:一测多评法与外标法测定结果无显著性差异,一测多评法可以替代外标法。结论:一测多评法准确可靠,可用于对三子散不同药材中的不同类成分进行含量测定。     

Reimbursement for Hip Fractures: The Impact of Varied Current Procedural Terminology Coding Using Relative Value Units

BackgroundMany orthopedic practices routinely code hip fracture hemiarthroplasty as Current Procedural Terminology (CPT) 27125 even though 27236 is the correct CPT code. Our objective is to determine the financial impact this simple mistake has on surgeon reimbursement.MethodsOur data comprised cases assigned International Classification of Diseases, Tenth Revision code S72.001A through S72.035A and CPT code 27125 or 27236 within the American College of Surgeons National Surgical Quality Improvement Program 2016-2017 database. Relative value units (RVUs) per CPT code and the Centers for Medicare and Medicaid Services reported that RVU conversion factor of $36.0896 per 1 RVU was used to calculate reimbursement per case. The dollar difference and percent difference per case was then calculated between cases assigned CPT code 27125 and those assigned 27236.ResultsOur total sample consisted of 12,287 National Surgical Quality Improvement Program cases. Of those, 4185 (34%) were cases of a hip fracture treated with hemiarthroplasty that were incorrectly coded as CPT code 27125. That error in coding results in a decrease in reimbursement of $35.01 per case, a 5.51% difference.ConclusionSince the current healthcare reimbursement model relies solely on CPT codes to determine RVUs, it is imperative that orthopedic surgeons understand the financial impact of incorrect coding. Although correct coding of hemiarthroplasty procedures for hip fractures is an easy task to fix in the future, we hope that through this study a greater emphasis is placed on coding in orthopedic surgery.